對肽樣品的質(zhì)譜分析前使用SPE小柱脫鹽的操作方法 

SPE脫鹽操作對于LC-MS分析很重要，對于常規(guī)LC-UV分析不是必需操作。 

試劑和設(shè)備：所有的試劑應(yīng)在使用前新鮮配制。 

當使用1 mL C18 SPE柱時 (貨號：218SPE1000)時，推薦的操作方法是： 

1. 用1.0 mL 乙腈預活化小柱。 
2. 用0.5 mL 0.1% TFA水溶液預平衡小柱。然后用0.5mL再重復一次。 
3. 將0.2 mL 含有0.1-0.2% TFA的肽樣上樣到SPE柱上，肽被SPE保留。 
4. 用0.5 mL 0.1% TFA水溶液清洗SPE小柱，除去弱保留的雜質(zhì)。 
5. 用0.2 mL 75:25 (或甚至 90:10) 不含任何TFA的乙腈/水溶液將肽從SPE柱上洗脫下來。 
6. 使用氮氣流（或使用真空離心管，加熱不應(yīng)超過30攝氏度）將洗脫收集物揮發(fā)至約10 μL。 
7. 加入190 μL 含有0.2% 甲酸和 0.01% TFA的 5:95 乙腈/水溶液。 
8. 渦旋混合后，樣品存放在冰箱中。此樣品即可用于LCMS進樣分析。 

注意：要讓溶液流過SPE小柱，可在SPE柱管上方施加正壓。施加正壓的辦法可以是將一個1000μL 塑料吸液槍頭(pipet tip)加在氮氣管路上，然后將此吸液槍頭摁在SPE小柱的頂端開口端。